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高效液相色谱仪色谱柱的选择和使用
发表时间:2022/4/26 11:16:23  |  点击率:347

高效液相色谱仪色谱柱的使用: 

1、 使用前仔细阅读色谱柱附带的说明书,注意适用范围,如pH值范围、流动相类型等; 

2、 使用符合要求的流动相; 

3、 使用保护柱; 

4、 如所用流动相为含盐流动相,反相色谱柱使用后,先用水或低浓度甲醇水(如5%甲醇水溶液),再用甲醇冲洗。 

5、 色谱柱在不使用时,应用甲醇冲洗,取下后紧密封闭两端保存; 

6、 不要高压冲洗柱子; 

7、 不要在高温下长时间使用硅胶键合相色谱柱;

高效液相色谱仪色谱柱注意事项:

1)流动相均需色谱纯度,水用20M的去离子水。脱气后的流动相要小心振动尽量不引起气泡。

2)柱子是非常脆弱的,每次做的方法,先不要让液体过柱子。

3)所有过柱子的液体均需严格地过滤。

4)压力不能太大,更好不要超过2000psi

高效液相色谱仪色谱柱的选择

为什么要使用“保护柱”

1.使用“保护柱”,能够延长色谱柱的使用寿命。简单的说,“保护柱”即是很短的色谱柱,填装和所使用液相色谱柱相同的填料。正确使用装在液相色谱柱前面的“保护柱”,可以阻拦一些容易损坏液相色谱柱的物质。而达到延长柱子寿命的效果。如果使用“保护柱”不当会造成反效果。因为都在保护柱使用过程中。如污染达到一定程度而没有及时更换,累积的杂物很可能会冲入色谱柱中,反而会造成色谱柱损坏。因此。使用“保护柱”时,更重要的是要知道什么时候该保护柱。该换的时候就必须要立即更换。

2.高品质的色柱子

选择高品质的柱子,并注意使用方法;可以延长柱子的使用寿命。一般认为同一厂牌、同一型号的柱子之间的品质都相同,对品质管理很严格的厂家而言,这种说法是成立的。但如果厂家质管理不够严格,即使是同一批号的新柱子之间的品质也有差异。所以,选用柱子时必须选择管理严格的高品质柱子,任何柱子使用过后都会产生变化。尤其如在强酸或强碱条件下使用,柱子更易产生变化。因此,我们尽量选用pH适用范围大的柱子。在开发新分析方法时,许多专家建议不要使用旧柱子。因柱子一经使用。柱性会改变;如此一来,使用旧柱子开发出来的新分析方法,很可能在使用同厂牌的新柱子分析时。发生无法达到预定效果的情况。总的说。开发新分析方法时使用品质好的新主子;并且一直柱子应该使用在一种分析方法上;则柱子寿命可以延长。

3.定期冲洗色柱子

定期冲洗柱子可以延长柱子使用寿命。柱子使用一段时间后总会有一些杂质累积在柱内。这些杂质不会随着流动相出来,自然会逐渐影响柱子的品质。这些杂质在后来的分析谱图上出现。而造成出现怪峰、基线不平等现象。简单的解决方法是用较强的流动相冲洗。更好是在每次分析某一产品完成后冲洗。如果分析时使用缓冲剂时,更好用水来取代缓冲剂。先使用有机和水的混合溶液为流动冲洗缓冲剂。接着再用100%有机溶剂冲洗。如果不先用有机和水的混合溶液冲洗,而直接用100%有机溶剂冲洗的话,缓冲剂很可能会沉淀出来,而损坏柱子的品质。使用10-20倍柱体积的量来冲洗基本就足够了。专家建议更好将100%有机溶剂冲洗的条件加在分析实验程序完毕的更后,如此一来每天在开机前都会用100%有机溶剂冲洗。一般硅胶柱可以反冲洗处理,即是在将冲洗前将柱子倒反接后再冲洗。打算使用反冲洗处理前,更好先参考柱子的保养说明书。

所以要真正保护柱子,使用柱子的寿命延长,更好是使用“保护柱”和定期冲洗柱子。

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